相差顯微鏡，又稱相襯顯微鏡，多用于觀察活細胞或者不染色的組織切片，有時也可用于觀察缺少反差的染色樣品。它是利用物體不同結構成分之間的折射率和厚度的差別，把通過物體不同部分的光程差轉變?yōu)檎穹ü鈴姸龋┑牟顒e，經過帶有環(huán)狀光闌的聚光鏡和帶有相位片的相差物鏡實現觀測的生物顯微鏡。

相差顯微鏡光路圖

    鏡檢時，光源只能通過環(huán)狀光闌的透明環(huán)，經聚光鏡后，這束光線通過被檢物體，因各部分的光程不同，光線將發(fā)生不同程度的偏斜（衍射）。由于透明圓環(huán)所成的象恰恰落在物鏡后焦點平面上，并和相板的共軛面重合。因此，未偏斜的直射光便通過共軛面，而發(fā)生偏斜的衍射光則由補償面通過。由于相板的共軛面與補償面的性質不同，它們分別將通過這兩部分的光線產生一定的相位差和強度的減弱，這樣兩組光線再經后透鏡的會聚，又復在同一光路上行進，而使直射光和衍射光產生光的干涉，變相位差為振幅差。干涉的結果，有的是振幅的同向量，合成波增大，即相長干涉，此部分便明亮；有的是振幅的異向量，合成波減少，即相消干涉，則此部分便暗淡。這樣在相襯鏡檢時，通過無色透明物體的光線，使人眼不可分辨的相位差轉變?yōu)槿搜劭煞直娴恼穹睢?/span>